Вы здесь

Вплив еубіотиків та наслідок ранового процесу.

Автор: 
Тугушев Алій Саітович
Тип работы: 
Дис. канд. наук
Год: 
2002
Артикул:
0402U003605
99 грн
(320 руб)
Добавить в корзину

Содержимое

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В соответствии с целью и задачами работы исследование состояло из экспериментальной части и клинических наблюдений, в которых как лечебное средство использованы препараты, включающие в себя живые бактерии, относящиеся к нормальной кишечной аутофлоре (эубиотики).
Клинические исследования проведены на базе кафедры факультетской хирургии Запорожского государственного медицинского университета (ЗГМУ) (зав. - д.мед.н. В.Н.Клименко), хирургического отделения №3 центра экстремальной медицины и скорой медицинской помощи (зав. - к.мед.н., доц. В.В.Ганжий), хирургического отделения городской больницы №2 (зав. - А.С.Смирнов).
Экспериментальная часть работы проведена на базе ЦНИЛ ЗГМУ (зав. - к.мед.н. С.Д.Тржизецинский) совместно с к.мед.н., доцентом В.И.Линенко. Цитоморфологические исследования мазков-отпечатков выполнены совместно с сотрудниками клинической лаборатории Запорожской областной клинической больницы (ЗОКБ) (зав. - И.П.Пуха). Иммунологические исследования выполнены в профильных лабораториях ЗОКБ (зав. - Л.И.Ташевская) и 1-ой детской городской больницы (зав. - Волкова Т.Д.).
Бактериологические исследования ран, крови и содержимого прямой кишки проведены на базе бактериологической лаборатории городской санитарной эпидемиологической станции (зав. - Г.И. Краснобаева).

2.1. Характеристика экспериментальных исследований.
Основу экспериментальных исследований составили опыты на 200 белых половозрелых нелинейных крысах обоего пола массой в среднем 180 - 200 грамм. При выборе экспериментальных животных и проведении экспериментов руководствовались положением "О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм использования экспериментальных животных". Изучалось влияние исходного состояния микробиоценоза кишечника на течение воспалительного процесса, влияние на него препаратов, нормализирующих кишечную микрофлору. Препараты вводились как до нанесения повреждения, так и после. Специальной подготовки животных перед экспериментом не проводилось. Все крысы находились в одинаковых условиях.
В первой серии опыты проводилась на трех группах животных (по 20 крыс в каждой).
Первая группа: в течение 10 дней крысы получали раствор колибактерина (E.сoli штамма М17 с определенными биохимическими свойствами, агглютинирующаяся специфической для нее сывороткой). Вторая группа: в течение 10 дней животные получали внутрь антибиотик левомицетин с целью деконтаминации кишечника; препараты вводились непосредственно в желудок через жесткий зонд. Третья группа была контрольной.
Колибактерин разводили в дистиллированной воде в количестве пять доз препарата на 50 мл воды. Вводили по 2,5 мл приготовленной взвеси, содержащей среднюю суточную дозу, рекомендуемую для применения. Таблетку левомицетина (0,25) растворяли в 100 мл воды так, что 1,0 мл приготовленного раствора содержал среднюю суточную дозу препарата в расчете на кг/веса.
Моделировали асептическое воспаление. С этой целью под подошвенный апоневроз правой задней лапы животного вводили 0,1 мл 0,25 %-го раствора формалина по методике, описанной Л.С.Салямоном (1951).
До начала эксперимента и перед нанесением повреждения производился посев содержимого прямой кишки на различные питательные среды. Материал из прямой кишки брался стерильным тампоном по общепринятым правилам (В.В.Меньшиков,1987).
После нанесения повреждения производился замер величины отека конечности онкометрическим методом через 30, 60 и 90 минут, 4 часа и далее ежедневно в течение 10 суток. Через 1, 6, 24, 48 часов из раны отсасывался раневой экссудат с последующим посевом на питательные среды. Одновременно делались мазки на предметное стекло для цитологического изучения состояния раны. Раневой экссудат для исследования получали путем пункции и аспирации тонкой стерильной иглой в зоне моделированного воспаления, соблюдая правила асептики. В ходе эксперимента последующие пункции производились из различных точек в области воспаленного участка.
Через 1, 6, 24 часа выполнялся забор крови для последующего бактериологического исследования. С этой целью стерильным скальпелем отсекали кончик хвоста, предварительно погруженного в 70 % раствор спирта. Полученную кровь (3 - 5 капель) над газовой горелкой вносили в пробирку, содержащую 1%-ый раствор глюкозы. Выросшие колонии в дальнейшем пересевали на твердые питательные среды.
Перед началом и в конце эксперимента производилось контрольное взвешивание крыс, так как изменение массы тела животного является неспецифическим показателем, отражающим общую устойчивость организма к воздействию различных стрессовых факторов.
Во второй серии опытов изучалась эффективность применения различных эубиотиков и их сочетания перед нанесением повреждения.
Исследования проводились на четырех группах животных по 20 в каждой. Первой группе крыс в течении десяти дней вводился препарат колибактерин, второй - препарат "Линекс", включающий комплекс лакто-, бифидобактерий и стрептококка (одна капсула разводилась в 50 мл дистиллированной воды, вводили по 2,5 мл приготовленной взвеси). Третья группа животных одновременно получала колибактерин и "Линекс". Четвертая группа - была контрольной.
Как и в первой серии опытов, всем крысам моделировали асептическое воспаление.
Производились бактериологические исследования содержимого прямой
кишки в день нанесения травмы и раневого отделяемого через 1, 6,
24 и 48 часов после повреждения.
Измерения величины отека поврежденной конечности производились на 1-е и 10-е сутки раневого процесса.
В третьей серии опытов изучалось влияние различных эубиотиков на течение и исход уже развившегося раневого процесса. Серия опытов включала четыре группы крыс по 20 в каждой. С целью создания животным равных условий, им в течение 10 дней проводилась деконтаминация кишечника путем введения внутрь левомицетина (модель дисбакте