Вы здесь

Морфологічні особливості селезінки після тимектомії та дії імунорегулюючих препаратів

Автор: 
Нужна Олена Костянтинівна
Тип работы: 
Дис. канд. наук
Год: 
2006
Артикул:
3406U001793
99 грн
(320 руб)
Добавить в корзину

Содержимое

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Данное экспериментальное исследование было проведено на 240 беспородных белых
крысах-самцах половозрелого возраста, которые находились в условиях вивария
Луганского государственного медицинского университета с исходной массой 130-150
г., в возрасте 16-18 недель.
Эксперимент проводился в осенне-зимний период. Во время эксперимента крысы
находились в помещении вивария при температуре 20-220С, влажности около 50%, в
пластиковых клетках по 6 особей в каждой. Вскармливание животных проводилось
согласно с нормами института питания АМН Украины, предназначенных для данного
вида животных. Содержание и манипуляции с животными проводились в соответствии
с положением «Общих этических принципов экспериментов на животных, утвержденных
первым Национальным конгрессом по биоэтике (Киев, 2001г). Учет массы животных
проводился каждые 10 дней. При наблюдении животные имели опрятный вид, были
здоровы и находились в обычном двигательном режиме.
Все животные делились на пять серий в зависимости от вида воздействия и
продолжительности наблюдения. Первую серию наблюдения составили животные I
группы, которым была проведена операция тимэктомия, контролем послужила I К
группа, включавшая ложнотимэктомированных животных (без экстракции тимуса).
Вторая серия животных включала II группу животных, которым вводился на
протяжении 10-ти дней внутрибрюшинно тимоген, контролем для них служили крысы
II К группы, которым вводился физиологический раствор натрия хлорида по той же
схеме. В третью серию животных входила III группа животных, которым на
протяжении 10 дней вводился через зонд в желудок декарис. Контролем для данной
группы служили животные III К группы с введением физиологического раствора по
той же схеме. Четвертая серия животных включала крыс IV группы, которым была
произведена операция тимэктомия с последующей коррекцией посредством
внутрибрюшинного введения тимогена, IV К группе вводился физиологический
раствор натрия хлорида после операции ложной тимэктомии. К пятой серии были
отнесены животные V и V К подопытных групп, соответственно были проведены
операции истинной и ложной тимэктомии, корректором для которых послужил декарис
и внутрижелудочное введение физиологического раствора, соответственно
(таб.2.1).
Таблица 2.1. Распределение животных в зависимости от их принадлежности к сериям
и группам по срокам наблюдения
Серии
№ №
групп
Воздействие на животных
Сроки наблюдения
Всего
1 сут.
7 сут
15 сут.
30 сут.
Тимэктомия
24
I К
Ложная тимэктомия
24
II
Тимоген
24
II К
Контроль к тимогену
24
III
Декарис
24
III К
Контроль к декарису
24
IV
Тимэктомия + тимоген
24
IV К
Ложная тимэктомия +физраст-вор
24
Тимэктомия + декарис
24
V К
Ложная тимэктомия
+физраст-вор
24
Итого
Всего
240
Каждая серия животных была распределена на группы в зависимости от
продолжительности наблюдения: 1, 7, 15, 30 суток. Животные подопытных и
контрольных групп находились в идентичных условиях и материал взятый от них
обрабатывался параллельно.
Стимуляцию иммунной системы производили с помощью тимогена и декариса, которые
довольно часто используются в клинической практике и являются доступными
лекарственными препаратами.
Тимоген представляет собой дипептид выделенный из тимусного препарата тималина.
Во время эксперимента был использован тимоген производства ОАО «Днепрофарм»
Украина П/96/158/6. Тимоген оказывает иммуностимулирующее действие и усиливает
неспецифическую резистентность организма. Действие препарата реализуется на
уровне предшественников Т-лимфоцитов и включает специфическое связывание
пептида с мембраной лимфоцита, увеличение внутриклеточного содержания ферментов
в лимфоцитах тимуса и селезёнки на ранних стадиях активации. Препарат ежедневно
вводился подопытным животным внутрибрюшинно в дозе 1 мкг на 1 кг массы тела в
течение 10 дней. Вышеуказанная доза полностью соответствовала относительной
дозировке, применяемой в клинической практике [102].
Декарис является действующим веществом препарата левомизола, являющегося
синтетическим иммуностимулятором. В нашей работе был использован декарис
произведенный по лицензии фирмы Jansser pharmaceutica, Бельгия Гедеон Рихтер
А.О. Будапешт-Венгрия. Декарис обладает нормализующим действием на
функциональное состояние Т-лимфоцитов и макрофагов, усиливает бластную
трансформацию лимфоцитов в ответ на митогены, повышает антителпродукцию за счет
стимуляции макрофагов и Т-клеток хелперов, активирует систему комплемента.
Препарат ежедневно вводился крысам с помощью зонда непосредственно в желудок в
течение 10 дней в дозе 1 мкг/кг массы. Дозировка этого препарата рассчитывалась
по аналогу применения в клинической медицине [59, 102].
Тимоген вводили крысам в дозе 0,02 мл внутрибрюшинно ежедневно в одно и тоже
время один раз в сутки. Физиологический раствор натрия хлорида вводили в
эквивалентном объёме внутрибрюшинно так же один раз в день. Декарис вводился в
дозе 0,05 мл в желудок через зонд один раз в сутки. Контролем послужили
животные, которым вводился физиологический раствор хлорида натрия по той же
схеме. Расчет дозировки всех вводимых лекарственных препаратов производили с
помощью формулы расчета для крыс [74]:
где r - коэффициент видовой выносливости для крысы = 3,62; R - коэффициент
видовой выносливости для человека = 0,57; D_человека – средне терапевтическая
доза лекарственного препарата, применяемая в клинике.
Операция тимэктомии проводилась у животных первой