Вы здесь

Зв'зки між активністю амінергічних нейронів стовбура мозку і ЕЕГ у кішки: модифікації під впливом бемітилу

Автор: 
Колотілова Оксана Іванівна
Тип работы: 
Дис. канд. наук
Год: 
2006
Артикул:
0406U002860
99 грн
(320 руб)
Добавить в корзину

Содержимое

РАЗДЕЛ 2
2.1. Анестезия, оперативная подготовка животного
Эксперименты проведены на восьми взрослых кошках обоего пола, весом 2–4 кг.
Выбор этого вида животных в качестве объекта исследований обусловлен тем, что
кошки являются традиционным видом подопытных животных в подобных исследованиях.
Кроме того, характеристики интегративной электрической активности ГМ кошек
близки к характеристикам ЭЭГ у человека [67, 68]. Животных наркотизировали
внутрибрюшинным введением нембутала в дозе 30-40 мг/кг. Непосредственно к
операции переходили после вхождения животного в третью стадию наркоза,
наступавшую через 10-15 мин после инъекции наркотического вещества.
Голову животного фиксировали в головодержателе стереотаксического прибора
СЭЖ-3. Череп обнажали сагиттальным разрезом, очищали от соединительной и
мышечной тканей. Открытый участок черепа предварительно обезжиривали 96 %
спиртом и на нем бормашиной делались насечки, это в дальнейшем способствовало
надежному сцеплению норакрила с поверхностью черепа при фиксации разъема. Затем
проводили операцию по креплению на черепе приспособлений для фиксации съемного
микроманипулятора оригинальной конструкции. Малый вес (2 г) и размеры (6*23*6
мм) такого микроманипулятора позволяли располагать его во время эксперимента на
голове животного (рис. 2.1).
В процессе операции в мозг кошек вживляли направляющую канюлю, из нержавеющей
стали, длиной (25 мм), кончик которой располагался в пяти мм над областью ГП и
девяти мм над областью ЯШ.. Канюля вводилась в мозг под углом, 21є к
фронтальной плоскости и 29є - к саггитальной. Угол наклона канюли рассчитывали
во избежание попадания ее в костный намет. Канюлю фиксировали в заданном
положении с помощью зубного акрилового цемента, предварительно накрывая ее
пластмассовой пластинкой во избежание попадания внутрь канюли акрилоксида. В
лобную кость черепа
вкручивали винт, который являлся индифферентным электродом, а рядом
устанавливали шестиканальный разъем для проведения сигналов при регистрации
ЭЭГ.
Рис. 2.1. Схема общего вида микроманипулятора (а) и микроэлектрода (б). Цифрами
обозначены структурные элементы микроманипулятора.
1- подающий винт; 2 – корпус микроманипулятора; 3- разъем для подключения
предварительного усилителя; 4 – контактная площадка для микроэлектрода; 5 –
внутренняя направляющая канюля; 6 – основание микроманипулятора; 7 – винты для
крепления; 8 – платформа микроманипулятора; 9 – быстротвердеющая пластмасса; 10
– кость черепа; 11 – наружная направляющая микроэлектрода; 12 – канюля,
введенная в мозг животного; 13 – микроэлектрод; 14 – структура-мишень; 15 –
мозг.
Нейронную активность отводили в области ГП, имеющего координаты Р = -1; L =
1…3; H = 7…9 [160] (рис. 2.2), где расположено само ядро и основная часть
НА-нейронов, которого проецируются в неокортекс [57, 58].
Рис. 2.2. Схема расположения области отведения импульсной активности
норадренергических нейронов голубого пятна. Срез соответствует Р -1,0 (атлас
Рейнозо-Суареца). SC – colliculus interrior; S – aqueducter cerebri; RF –
formatio reticularis; DR – dorsalis raphe; CS – colliculus superrior.
Предполагаемое место отведения обведено пунктиром.
Нейронную активность клеток ЯШ отводили в зоне с координатами Р =-1…-2; L =
2…0; H = 4,5…9, где расположены дорсальное и центральное ЯШ, также
проецирующиеся в неокортекс (рис. 2.3) [58, 160].
Рис. 2.3. Схема расположения области отведения импульсной активности
серотонинергических нейронов ядер шва. Срез соответствует Р -1,0 …-2. Остальные
обозначения такие же, как и на рис. 2.2
К аминергическим клеткам исследуемые нейроны были отнесены на основании
относительно низкой частоты фоновой активности (менее 8 с–1), полифазности ПД,
их большой продолжительности (2.5–5.0 мс) и соответствующей локализации клеток
в стволе мозга (рис. 2.4) [85, 105].
Рис. 2.4. Потенциалы действия предполагаемых серотонинергических– (А), и не
серотонинергических– (Б) нейронов.
Стрелками и вертикальными линиями указаны измеренные значения длительности
потенциала действия, мс.
ЭЭГ отводили от кости черепа над лобной, теменной, затылочной и височной
областями коры. Для этого в кости черепа зубным бором делались небольшие
углубления, и в эти лунки вставляли позолоченные электроды (площадью 0,5 мм2),
отводящий конец погружали в углубление кости и сверху заливали норакрилом, а
противоположный припаивали к шести шестиканальному разъему. Схема расположения
ЭЭГ электродов представлена на рис. 2.5. Один из шести каналов разъема был
соединен с индифферентным электродом, который использовался как заземление.
Рис. 2.5. Схема расположения регистрирующих электродов и канюли на голове у
кошки.
1- канюля с платформой для крепления микроманипулятора; 2 – платформа для
предварительного усилителя; 3 – шестиштырьковый разъем (затемненный участок -
разъем для заземления); 4 – электроды, регистрирующие электроэнцефалограмму; 5
– индифферентный электрод для регистрации импульсной активности.
Исследование импульсной активности отдельных нейронов и суммарной электрической
активности неокортекса у каждого отдельного животного проводили на протяжении
одного - пяти месяцев после операции.
Послеоперационный уход заключался в регулярном промывании перекисью водорода и
смазыванием преднизалоновой мазью и раствором бриллиантовой зелени раневых
поверхностей, а также в мерах, направленных на их скорейшее заживление, а также
обработка антибиотиками (внутримышечное введение).
2.2. Отведение, усиление и регистрация
Через 2-3 суток после операции состояние животного обычно позволяло приступать
к эксп