Вы здесь

Зміна больової чутливості щурів під впливом гіпокінетичного стресу.

Автор: 
Заячникова Тетяна Валентинівна
Тип работы: 
Дис. канд. наук
Год: 
2007
Артикул:
0407U003665
99 грн
(320 руб)
Добавить в корзину

Содержимое

РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Организация экспериментов с лабораторными животными
Экспериментальная часть работы выполнена на 310 белых беспородных крысах-самцах массой 180-250 г, полученных из питомника научно-исследовательского института биологии Харьковского национального университета им. В.Н. Каразина в течение 2005-2007 годов (табл. 2.1).

Таблица 2.1.
Объем проведенных исследований (количество крыс, исследованных по каждому показателю)
Экспериментальные группыКонтроль-ная группа (ложный болевой стресс)"Формали-новый тест"
(ФТ)"Уксусный
тест"
(УТ)Тест "горячая пластинка" (ТГП)Тест электрости-муляции
(ТЭС)Кф45----ФТ-45---ГК+ФТ-45---Ку25----УТ--25--ГК+УТ--25--ТГП---25-ГК+ТГП---25-ТЭС----15ГК+ТЭС----15Н+ФТ-10---ГК+Н+ФТ-10---70110505030Всего310
Выбор крыс в качестве объекта исследования в диссертационной работе обусловлен следующими соображениями:
1. возможность формирования групп животных, одинаковых по возрасту, массе и конституциональным особенностям;
2. крысы являются удобным объектом исследования для проведения массовых острых и хронических экспериментов;
3. близость физиологических процессов у человека и крыс при большей их скорости и интенсивности у последних;
4. крысы обладают повышенной чувствительностью к ограничению двигательной активности [145];
5. в литературе накоплен большой фактический материал о структурно-функциональных изменениях различных органов и систем у этих животных при воздействии факторов разной природы и интенсивности, в том числе, и стресс-факторов.
В экспериментальные группы отбирали животных одинакового возраста, характеризующихся одинаковой двигательной активностью в тесте ОП [22]. Подобный отбор позволил сформировать однородные группы животных с одинаковыми конституциональными особенностями, однотипно реагирующих на действие различных факторов.
Согласно литературным данным [123, 148], животные со средней двигательной активностью и низкой эмоциональностью преобладают в популяции, поэтому можно утверждать, что у них развивается наиболее типичная реакция на экспериментальные воздействия. В связи с этим эксперименты проводились на животных со средней двигательной активностью, определенной в тесте ОП.
Для изучения реакций организма на последовательное воздействие ГК и болевого фактора, проведено пять серий экспериментов (рис. 2.1).
В первой серии экспериментальных исследований изучалось модифицирующее действие ГК стресса на изменение болевой чувствительности у крыс при экспериментально вызванной тонической соматической боли в "формалиновом тесте" (ФТ) [194, 239]. Для этого экспериментальных животных разделили на три равноценные группы по 45 особей в каждой (рис. 2.1). Животным первой контрольной группы (Кф) подвергали подкожной инъекции в тыльную поверхность стопы задней конечности физиологического раствора (0,9 % раствор NaCl - 0,08 мл на 100 грамм веса). У животных второй (ФТ) и третьей (ГК+ФТ) групп тоническую боль вызывали введением 5%-ного раствора формалина в дорсальную поверхность стопы задней конечности. Животные третьей группы (ГК+ФТ) предварительно подвергались действию ГК стресса, который создавался помещением крыс в специальные пеналы из оргстекла, состоящие из пяти ячеек, в которых они находились в течение девяти суток по 22 часа ежедневно. Показателями интенсивности боли являлись частота и продолжительность болевой реакции (лизание поражонной конечности) и неболевых (двигательная активность и пассивное поведение) поведенческих проявлений в течение 90 минут наблюдения после инъекции формалина.
Вторая серия экспериментов была посвящена изучению модифицирующего действия ГК стресса на изменение болевой чувствительности у крыс при экспериментально вызванной висцеральной боли в "уксусном тесте" (УТ) [215, 233]. Экспериментальных животных распределяли на три равноценные группы по 25 особей в каждой. Животных первой группы подвергали внутрибрюшинной инъекции физиологического раствора (0,9 % раствор NaCl - 1 мл на 100 грамм веса) (Ку). Животные второй группы подвергались действию висцеральной боли (УТ) путем перитонеального введения 2 % раствора уксусной кислоты. Крысы третьей группы находились в условиях девятисуточной ГК и ежедневно подвергались действию УТ (ГК + УТ) и болевому воздействию. Показателями интенсивности боли являлись длительность и частота тонических поз (корчей) и реакции лизания живота за 90 минут наблюдения. Неболевые поведенческие проявления были рассмотрены в аспектах продолжительности двигательной активности и пассивного поведения (рис. 2.1).
В третьей серии экспериментов моделировали острую термическую боль в тесте "горячая пластинка" (ТГП) [236] в течение девяти суток. Животных разделили на две равноценные группы по 25 особей - ТГП и ГК+ТГП (рис. 2.1). Показателями болевой чувствительности у животных этих групп служили болевой порог (БП), за который принимали минимальную температуру металлической пластины установки, сопровождающуюся появлением первых болевых реакций (отдергивание и лизание конечности) и уровень выносливости боли (УВБ) - температуру, при которой наблюдалось развитие другого уровня ноцицептивного возбуждения, сопровождавшегося максимальным усилением эмоционально-поведенческих проявлений: генерализованная двигательная реакция побега, прыжка и вокализации.
В четвертой серии исследований использовали тест электростимуляции (отдергивания лап) (ТЭС) для моделирования острой боли путем электрического болевого раздражения. Экспериментальных животных разделили на две группы по 15 особей (ТЭС и ГК+ТЭС) и измеряли БП по величине силы тока (в миллиамперах, мА) (рис. 2.1).

Рис. 2.1. Схема проведения экспериментальных исследований.
Примечание: ГК - гипокинезия; Кф - инъекция физраствора в дорсальную поверхность стопы; Ку - перитониальная инъекция физраствора; ТГП - термическое воздействие в тесте "горячая пластинка"; ТЭС - тест электростимуляции;